霉菌毒素是由真菌產(chǎn)生的有毒的次級代謝產(chǎn)物，其可以通過飼料或食品進入到人和動物體內(nèi)，從而引起急性或慢性中毒，危害人類和動物健康。霉菌的生長與地域、氣候、季節(jié)等密切相關(guān)，因此不同地區(qū)、時間、季節(jié)的飼料和飼料原料受霉菌毒素污染的情況也有所不同。
 

　　目前關(guān)于霉菌毒素的檢測方法主要有：薄層色譜法(TLC)、酶聯(lián)免疫法(ELISA)、氣相色譜法(GC)和高效液相色譜法(HPLC)等。由于TLC和ELISA方法不能準確定量，GC方法雖然檢測靈敏度高，但樣品前處理復(fù)雜，雜質(zhì)干擾大。目前對霉菌毒素的檢測用HPLC法比較認可，用免疫親和柱對經(jīng)過萃取的樣品進行凈化后，雜質(zhì)少，檢測限低。經(jīng)試驗摸索研究，建立了免疫親和柱-高效液相色譜檢測的方法，該方法靈敏度高、回收率高、重復(fù)性好。本研究的目的是利用免疫親和柱-高效液相色譜法調(diào)查中國各個地區(qū)飼料及原料中AFB1、ZEN和DON的污染情況，為飼料生產(chǎn)企業(yè)和養(yǎng)殖者提供參考。
 

　　1 材料與方法
 

　　1.1 試驗材料
 

　　高效液相色譜儀(SHIMADZU LC-20AT)；熒光檢測器(SHIMADZU RF-20A)；色譜柱為cloversil C18色譜柱，5μm，4.6mm×150mm；色譜工作站(島津高效液相色譜LC工作站)；AFB1、ZEN和DON免疫親和柱，由北京中檢維康技術(shù)有限公司生產(chǎn)。具體操作步驟參考中檢維康公司霉菌毒素檢測的標準操作程序。
 

　　1.2  試驗方法
 

　　1.2.1 樣品采集
 

　　1.2.2 試樣的制備與提取
 

　　試樣制備與提取的具體操作步驟參考中檢維康公司免疫親和柱的標準操作程序執(zhí)行。
 

　　1.2.3 毒素的檢測
 

　　使用免疫親和柱-高相液相色譜法對樣品中的AFB1、ZEN和DON進行檢測。黃曲霉毒素檢測方法參照GB/T 30955-2014《飼料中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2的測定免疫親和柱凈化-高效液相色譜法》中的測定方法，并根據(jù)試驗情況進行適當調(diào)整；玉米赤霉烯酮檢測方法參照GB/T 28716-2012《飼料中玉米赤霉烯酮的測定免疫親和柱凈化-高效液相色譜法》中的測定方法，并根據(jù)試驗情況進行適當調(diào)整；嘔吐毒素檢測方法參照GB/T 30956-2014《飼料中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的測定免疫親和柱凈化-高效液相色譜法》中的測定方法，并根據(jù)試驗情況進行適當調(diào)整。
 

　　2 結(jié)果與分析
 

　　按照飼料樣品中AFB1、ZEN和DON含量高于檢出限作為檢出，本研究中陽性樣品設(shè)定檢出限值如下：AFB1 0.5μg/kg、ZEN 1μg/kg和DON 10μg/kg。飼料和原料中AFB1、ZEN和DON允許參照我國國家標準GB 13078-2017《飼料衛(wèi)生標準》執(zhí)行。
 

　　2.1 所有樣品總體情況
 

　　飼料樣品中4種霉菌毒素均存在超標現(xiàn)象，且樣品中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮的陽性檢出率高于2020年；
 

　　植物性原料中4種霉菌毒素均存在超標現(xiàn)象，且樣品中玉米赤霉烯酮和嘔吐毒素的最高值高于2020年；
 

　　粕類、麩類樣品中玉米赤霉烯酮、T-2毒素和嘔吐毒素均存在超標現(xiàn)象；
 

　　玉米副產(chǎn)物中4種霉菌毒素均存在超標現(xiàn)象，且樣品中玉米赤霉烯酮的最高值高于2020年；玉米樣品中赤霉烯酮和嘔吐毒素污染較嚴重。
 

　　此外，多種毒素共存現(xiàn)象明顯，霉菌毒素的共同污染可以產(chǎn)生累加和協(xié)同的毒性作用；在這項研究中，樣品中霉菌毒素共同污染非常普遍，超過 95% 的樣品含有2 種或更多的霉菌毒素。
 

　　總之，我國飼料及原料中霉菌毒素污染仍處于一個較危險的水平，必須加強對各類霉菌毒素的檢測和長期監(jiān)控，這對更有力地保障畜禽養(yǎng)殖發(fā)展和食品安全非常必要。