橘霉素親和柱原理:
樣品經(jīng)提取液提取、過(guò)濾、 稀釋,然后通過(guò)鍵合有桔青霉素特殊抗體的免疫親和柱。此時(shí), 桔青霉素被親和柱中的抗體特異性的吸附,用水或緩沖液將免疫親和柱上的雜質(zhì)除去,然后用甲醇使抗體變性,從而將桔青霉素從親和柱上洗脫下來(lái)。用 HPLC 或液質(zhì)方法進(jìn)行定量檢測(cè)。
橘青霉素是一種來(lái)自自然霉菌的毒素,會(huì)污染大米、小麥、面粉、大麥、玉米、黑麥、燕麥、花生,還有水果。紅米也是一種廣泛的污染物,紅米不僅是許多亞洲國(guó)家的主食,同時(shí)也是許多其他食品的主要成分。它也用于流行的草藥補(bǔ)充劑紅酵母,用于降低膽固醇水平的大米提取物。
橘霉素親和柱注意事項(xiàng):
● 使用前,免疫親和柱需回至室溫(22~25℃)。
● 親和柱2~8℃儲(chǔ)存,不得凍存。
● 不要使用過(guò)了有效日期的免疫親和柱。
● 取樣量:根據(jù)需要能夠。適當(dāng)增加或減少取樣量,注意提取液量要相應(yīng)改變。
● 柱容量:500ng,當(dāng)樣本中待檢的含量除以稀釋倍數(shù)高于柱容量時(shí),需要適當(dāng)降低上樣液的體積,重新檢測(cè)。
● PH:親和柱的上樣溶液pH需在6~8之間,若偏離此范圍需要用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH。
● 上機(jī)檢測(cè)時(shí)的溶劑與流動(dòng)相保持一致能夠。消除溶劑效應(yīng)的影響。
● 桔青霉素可致畸,應(yīng)戴手套口罩等防護(hù)工具操作。
● 使用過(guò)的容器及桔青霉素溶液用次氯酸鈉溶液(5%V/V)浸泡。
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